便攜微生物檢測儀微生物培養的方法

不同種類微生物的培養需要使用不同的培養基。同時一種微生物也可以通過多種的培養基和培養方法進行培養。這樣主要介紹使用微生物檢測儀的各種不同培養方法。
1.濾膜法
濾膜是一種微孔性薄膜。將水樣注入已滅菌的放有濾膜（孔徑0.45μm）的抽濾裝置中，經過抽濾，細菌會被截留在膜上，然后將濾膜貼于相應細菌的培養基上，進行培養。經過培養后，濾膜上會根據不同的培養基，出現各種不同的菌落。計算濾膜上生長的菌落數，可計算出每1L水中含有的各種細菌的菌群數。濾膜法具有高度的再現性，可用于檢驗各種水樣，能比多管發酵法更快的獲得肯定的結果。
1.1濾裝置
抽濾裝置包括電池、真空泵、斗式過 濾杯、中間砂心過濾頭（燒結濾頭）、三角集液瓶以及不銹鋼制固定夾。以無菌操作，依照右圖把裝置安裝起來。
1.2水樣過濾
用無菌鑷子（火焰滅菌器滅菌）夾取滅菌濾膜邊緣，貼在已滅菌的燒結濾頭（火焰滅菌器滅菌）上，夾好抽過濾杯。將適量的水樣注入過濾杯中，加蓋，開支真空泵，把水中的所有細菌抽濾在濾膜的表面。
1.3細菌培養
將濾膜移到培養皿里已被相應培養基浸潤的吸收墊上，在移動培養箱內進行培養。
1.4結果觀察與報告
計算濾膜上生長的菌群菌落個數，根據過濾水樣的量，計算1L或100ml水樣中菌群數。
2.酶底物法
酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸菌群及大腸埃希氏菌檢測標準方法，酶底物法是目前水中總大腸菌群及大腸埃希氏菌檢測的最先進方法。以其方便快捷，假陽性低，適用大量樣品快速檢測等優點正逐步被國內檢測部門所認可。相對于多管發酵和濾膜法，酶底物法檢測步驟大大減少，而且對實驗環境要求不高，檢測時間可減少到24小時，在日常水樣監測及應急監測中具有很好的應用前景，可及時檢測，預防，最大限度的減少重大公共安全事故的發生幾率。
2.1操作步驟：
用 100 mL的無菌稀釋瓶量取 100 mL 水樣，加入一管酶底物法培養基粉末，混搖均勻使之完全溶解。準備 10 支10ml適當大小的滅菌試管，用無菌吸管分別從上述稀釋瓶中吸取10mL水樣至各試管中，放入培養箱中培養24 h。
2.2結果觀察與報告：
大腸菌群：將培養 24 h之后的試管取出觀察，如果試管內水樣變成黃色則表示該試管含有總大腸菌群。計算有黃色反應的試管數，對照下表1查出其代表的總大腸菌群最可能數CMPN）。 結果以MPN/100 mL 表示。 如所有管未產生黃色，則可報告為總大腸菌群未檢出。
表1   不同陽性結果的最可能數（MPN）及 95%可信范圍

陽性試管數	總大腸菌群(MPN/100ml)	95%可信范圍
		下限	上限
0	＜1.1	0	3.0
1	1.1	0.03	5.9
2	2.2	0.26	8.1
3	3.6	0.69	10.6
4	5.1	1.3	13.4
5	6.9	2.1	16.8
6	9.2	3.1	21.1
7	12	4.3	27.1
8	16.1	5.9	26.8
9	23	8.1	59.5
10	＞23.0	13.5

大腸埃希氏菌：將培養24h顏色變成黃色的水樣的試管，在暗處用紫外燈觀察，如果有藍色熒光產生則表示有大腸埃希氏菌。計算有熒光反應的試管數，對照表1 查出其代表的大腸埃希氏菌最可能數MPN）， 結果以MPN/100 mL 表示。 如所有管未產生藍色熒光，則可報告為大腸埃希氏菌未檢出。